DNA亲子鉴定之今朝的DNA序列多态性检测要领

发布日期:2021-07-07浏览量:151

初期的序列变异检测采用份子克隆和份子杂交手艺,操纵非常繁琐。自PCR手艺成立后,序列阐明手艺有了长足的前进,以PCR为根蒂根基衍生出多种有用的序列阐明要领。今朝的DNA序列多态性检测要领主要有如下几种:
(1) DNA摩列测定手艺(DNA sequencing);
(2)特同性寡核苷酸探针杂交手艺(PCR - ASO);
(3)限定性片断长度多态性阐明手艺 (PCR - RFIP);
(4)序列特同性引物扩增手艺(PCR - SSP);
(5)单链构象多态性阐明 ( PCR - SSCP);
其余另有随机引物扩增手艺(PCR - RAPD),小卫星变异反复单元多态性阐明( PCR - MVR)等。在上述序列多态性阐明手艺中,以序列测定和PCR - ASO阐明较常用。常应按照所要检测的靶DNA特点选择有用的要领,比方对已知渐变碱基序列的DNA片断阐明,多采用PCR - ASO、PCR - RFLP、PCR - SSCP、PCR - SSP等阐明要领,这种要领比力经济实用。若是对某DNA靶片断中随机产生的或多个碱基的变异,则需采用DNA片断序 列测定。20世纪90年代后,以PCR为根蒂根基的测序要领已日益成熟和完善,成为通常手艺。测序阐明得到的信息量大,在法医物证鉴定中有较高的实用代价。比拟之下,PCR - ASO探针杂交手艺成效必定,可以区别相差1个碱基的等位基因,根蒂根基设备请求不高,操纵相对付简略。DNA序列多态性分型在法医学鉴定中比力胜利的例子有mtDNA分型,HIA – DQA基因座,多标识表记标帜零碎(PM零碎),某些血型零碎如ABO基因座分型等。

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